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培養基制備的注意事項

 更新時(shí)間:2024-06-21 點(diǎn)擊量:157
  培養基的作用是為微生物提供生長(cháng)和繁殖所需的營(yíng)養物質(zhì)和環(huán)境條件。培養基的質(zhì)量直接關(guān)系到檢驗結果的準確性和可靠性,因此對于微生物檢驗而言,培養基的質(zhì)量控制尤為重要。那么你知道培養基制備的注意事項有什么嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
  一、配置要求
  正確地制備培養基是進(jìn)行微生物檢驗的基礎。當實(shí)驗人員使用商業(yè)化脫水合成培養基來(lái)配制培養基時(shí),應嚴格按照產(chǎn)品說(shuō)明進(jìn)行配制,并做好配制記錄。在配制過(guò)程中,實(shí)驗人員需要遵守相關(guān)操作標準,戴上口罩以防吸入含有有毒物質(zhì)的培養基粉末。在稱(chēng)量和溶解培養基時(shí)應使用專(zhuān)門(mén)的角匙,避免使用金屬制品以防止金屬離子污染培養基,從而影響微生物的生長(cháng)。在準確稱(chēng)量后,應首先加入適量的水進(jìn)行充分溶解,然后再加入所需量的水進(jìn)行加熱。在加熱過(guò)程中,應不斷攪拌以防止培養基在容器底部積聚。調節培養基的pH值后,將其分裝到比培養基體積大20%的容器中,并按照說(shuō)明進(jìn)行滅菌處理。對于粉末狀態(tài)的培養基,在開(kāi)封后應妥善保存在陰涼干燥處,并及時(shí)使用,以免受潮、結塊或污染等情況發(fā)生。二、配制用水
  水是制備培養基不可缺一部分,通常使用純化水。此外,還應定期檢查用于配制培養基的水的微生物污染情況,以確保其符合純化水的要求。
  三、滅菌
  滅菌能夠確保培養基的質(zhì)量符合標準。在實(shí)驗室中,常采用濕熱滅菌法對培養基進(jìn)行滅菌處理。培養基的滅菌應按照產(chǎn)品使用說(shuō)明的要求進(jìn)行操作,并在每次滅菌時(shí)放置壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡以驗證滅菌效果。有些培養基可以通過(guò)煮沸的方式進(jìn)行滅菌,例如結晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養基和亞硫酸鉍瓊脂培養基。實(shí)驗人員應及時(shí)將培養基從滅菌鍋中取出,并盡快冷卻至所需溫度,以防止加熱過(guò)度對實(shí)驗數據產(chǎn)生影響。在使用培養基前,還需檢查其pH值、色澤和均勻度等指標,以確保符合要求后貼上標簽,并標明名稱(chēng)、日期、有效期等基本信息。
  四、制備
  在制備平板培養基時(shí),應將經(jīng)滅菌處理的培養基傾注于經(jīng)滅菌處理的干燥平皿中,使其形成至少3mm的厚度。一般來(lái)說(shuō),直徑為90mm的平皿通常需要加入18~20mL的瓊脂培養基,而需要保存或培養超過(guò)48小時(shí)的培養基則需要傾注更多的培養基。制備好的培養基應立即使用或儲存,儲存時(shí)應標記培養基的名稱(chēng)和制備日期,并將其密封后放置在2~8℃的冰箱中。而在制備斜面培養基時(shí),應先將培養基分裝到試管中,通常每管加入10mL的培養基,然后進(jìn)行高壓滅菌。在培養基冷卻凝固前,將試管傾斜一定角度放置,待其冷卻凝固后方可使用和儲存。至于液體培養基,則根據使用要求直接分裝至三角瓶或試管中,進(jìn)行滅菌處理后冷卻至室溫,即可直接使用或儲存。
  五、儲存
  驗收入庫的培養基應嚴格按照生產(chǎn)廠(chǎng)家標明的儲存條件、保存期限、使用方法保存和使用。開(kāi)封后的商品化脫水合成培養基要放置在密閉容器中保存,在瓶身注明s次開(kāi)封日期。實(shí)驗室自制培養基應避光、干燥保存,需冷藏的培養基可放置在2~8℃冰箱中保存,平板保存時(shí)間通常為2~4周,瓶裝及試管裝培養基保存時(shí)間一般為3~6個(gè)月,具體效期應進(jìn)行驗證。每次使用培養基前,要觀(guān)察顏色變化、流動(dòng)性、均勻性、是否結塊和是否污染等情況。如果發(fā)現培養基出現受潮、結塊、其他性狀明顯改變的情況,應停止使用。
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